抗酸染色有何作用?
抗酸染色法,主要用于鉴别细菌,其原理是:大部分细菌都具有细胞壁,而细胞壁的主要组成成分是肽聚糖(用抗酶抑制剂抑制蛋白水解酶可保持细胞壁的完整性),在细胞壁外还覆盖着一层脂类双分子层,使细胞成为一个相对独立的生命体。 革兰阳性菌与革兰阴性菌的细胞壁化学组成上有重大区别,因此对两种染色剂的反应也有不同,从而可以通过染色特性来区分两者。
其中,革兰阳性菌被苯胺蓝染成蓝色,而革兰阴性菌不被染色或者仅被轻度染色,这种差异就是基于上述区别而来的。细菌经过染色后,通过光学显微镜观察细胞形态和染色特征,可以初步判断细菌的菌属、种及致病性等。 如果要鉴定到菌株水平,则应采用微生物学检验中的其他技术,如菌种保藏、菌种鉴定等。
1.3.2 染色步骤 (1)制片:取培养后的细菌标本少量涂布于载玻片上,干燥后置载物台上。
(2)染色:将上述载玻片浸入已配制好的染色液中,盖上盖玻片,用镊子夹起载玻片边缘使染色液充分接触,小心放置染色盒内。
(3)脱水:将染色完毕的载玻片放入酒精溶液中浸泡过夜。
(4)透明:将以上染色的载玻片从酒精溶液中取出,用清水冲洗表面灰尘等物,并晾干。
(5)封片:将适量甲醛溶液加入少许冰醋酸后,滴加到已经干燥的载玻片上,待其自然晾干后即可进行光镜观察。